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特性 | 優(yōu)勢(shì) | RIPA裂解液是一種傳統(tǒng)的組織細(xì)胞快速裂解液。本產(chǎn)品主要含有Triton X-100及其他多種裂解緩沖液。能夠有效裂解組織細(xì)胞中的可溶性蛋白,并將其釋放。用于WB實(shí)驗(yàn)。 |
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特性 | 優(yōu)勢(shì) | RIPA裂解液是一種傳統(tǒng)的組織細(xì)胞快速裂解液。本產(chǎn)品主要含有Triton X-100及其他多種裂解緩沖液。能夠有效裂解組織細(xì)胞中的可溶性蛋白,并將其釋放。用于WB實(shí)驗(yàn)。 |
產(chǎn)品簡介:
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer-Strong)是一種傳統(tǒng)的組織細(xì)胞快速裂解液。本產(chǎn)品主要含有Triton X-100及其他多種裂解緩沖液。能夠有效裂解組織細(xì)胞中的可溶性蛋白,并將其釋放。用于WB實(shí)驗(yàn)。裂解獲得的蛋白可用BCA蛋白定量試劑盒進(jìn)行蛋白濃度測(cè)定。
操作步驟:
1.細(xì)胞樣本裂解:
取適量RIPA裂解液,在使用前加入1%PMSF(PMSF的終濃度為1mM)蛋白酶抑制劑(終濃度為1X)。
貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液清洗1次,按照 6 孔板每孔加入200微升裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。通常裂解液接觸細(xì)胞 1-2 秒后,細(xì)胞可被裂解。
懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,VOTEX震蕩幾秒。按照6孔板每孔細(xì)胞加入 200微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細(xì)胞沉淀.如果細(xì)胞量較多,則分裝成 50-100 萬細(xì)胞/管,然后再裂解。
2.組織樣本裂解:
將組織剪成小碎塊,取適量RIPA裂解液,在使用前加入1%PMSF(PMSF的終濃度為1mM)或蛋白酶抑制劑(終濃度為1X),按照每20mg組織加入200ul裂解液(若為不易裂解的組織可酌情多添加裂解液)
利用研磨器或者超聲波裂解組織細(xì)胞充分裂解后,按照10000-14000g離心,取上清,進(jìn)行后續(xù)的 PAGE、Western 和免疫沉淀等操作。
產(chǎn)品特色:
RIPA裂解液是一種傳統(tǒng)的組織細(xì)胞快速裂解液。本產(chǎn)品主要含有Triton X-100及其他多種裂解緩沖液。能夠有效裂解組織細(xì)胞中的可溶性蛋白,并將其釋放。用于WB實(shí)驗(yàn)。裂解獲得的蛋白可用BCA蛋白定量試劑盒進(jìn)行蛋白濃度測(cè)定。
本品不含有酶抑制劑,使用時(shí),需添加1% PMSF或者蛋白酶抑制劑混合液(100X)用于蛋白酶抑制,若檢測(cè)指標(biāo)涉及磷酸化蛋白,還需添加磷酸酶抑制劑混合液(100X)用于蛋白樣品中磷酸酶抑制。
保存條件:
保存:4℃,運(yùn)輸:4℃或RT,有效期:24個(gè)月。
注意事項(xiàng):
1.為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
2.本產(chǎn)品僅供科研,請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。
注意事項(xiàng):
1、本產(chǎn)品僅供科研使用。請(qǐng)勿用于醫(yī)藥、臨床診斷或治療,食品及化妝品等用途。請(qǐng)勿存放普通住宅區(qū)。
2、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿好實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套和口罩操作。