懸浮細(xì)胞收集的處理方法

注意：瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能繼續(xù)使用，請(qǐng)換用按照說(shuō)明書(shū)培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來(lái)培養(yǎng)細(xì)胞。培養(yǎng) 懸浮細(xì)胞建議用未經(jīng)TC處理的培養(yǎng)瓶。

STEP1:靜置4h后，請(qǐng)將瓶?jī)?nèi)所有細(xì)胞收集至6個(gè)15ml 的離心管110g(1000rpm)離心3min, 將所有離心 后的細(xì)胞沉淀收集到一個(gè)T25 培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，平放10分鐘，鏡下觀(guān)察細(xì)胞密度，拍照記錄后放入培養(yǎng)箱中繼 續(xù)培養(yǎng)，第二天密度達(dá)到80%即可傳代；

STEP2:懸浮細(xì)胞半換液處理：將培養(yǎng)瓶豎立在培養(yǎng)箱中靜置1小時(shí)左右，輕輕吸掉瓶?jī)?nèi)3ml 培養(yǎng) 基，然后補(bǔ)給3ml 的細(xì)胞完全培養(yǎng)基，傳代的時(shí)候可以直接補(bǔ)給5ml 細(xì)胞完全培養(yǎng)基，分兩個(gè)培養(yǎng)瓶培養(yǎng)，一般這樣傳代3次左右可以離心傳代一次，去掉死細(xì)胞；

STEP3:懸浮細(xì)胞傳代方法:觀(guān)察細(xì)胞無(wú)碎片無(wú)死細(xì)胞的情況下，建議直接加入新鮮的細(xì)胞完全培養(yǎng)基直 接分瓶即可。

售后服務(wù)：

1.常溫細(xì)胞為 T25 培養(yǎng)瓶發(fā)貨，若收到細(xì)胞后狀態(tài)差，活率低，請(qǐng)當(dāng)天拍照記錄，發(fā)給技術(shù)支持或 者銷(xiāo)售人員；根據(jù)情況，不能調(diào)整或者調(diào)整培養(yǎng)一周后，狀態(tài)沒(méi)好轉(zhuǎn)的，可給予重發(fā)細(xì)胞。

2. 收到細(xì)胞24小時(shí)內(nèi)出現(xiàn)細(xì)菌、真菌、霉菌污染給于免費(fèi)重發(fā)。4 8 小 時(shí)檢測(cè)支原體陽(yáng)性無(wú)條件重發(fā) (吸取上清至冰箱保存48小時(shí)之后檢測(cè)的不算準(zhǔn)確結(jié)果)收到細(xì)胞有污染現(xiàn)象，請(qǐng)于收貨當(dāng)天 及時(shí)拍照記錄，提供清晰的照片(照片為原培養(yǎng)瓶未拆封外觀(guān)照和顯微鏡下細(xì)胞狀態(tài)的照片);在培養(yǎng) 瓶未開(kāi)封的情況下，可給予重發(fā)細(xì)胞。

3.若收到細(xì)胞有漏液現(xiàn)象，請(qǐng)于收貨當(dāng)天及時(shí)拍照記錄(照片為原培養(yǎng)瓶未拆封外觀(guān)照和顯微鏡下細(xì) 胞狀態(tài)的照片);請(qǐng)保留原瓶培養(yǎng)基，并將原瓶培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到一個(gè)無(wú)菌的容器內(nèi)培養(yǎng)，培養(yǎng)3天內(nèi)出現(xiàn) 細(xì)胞污染現(xiàn)象，可給予重發(fā)細(xì)胞。

4. 收到常溫細(xì)胞時(shí)狀態(tài)無(wú)異常，用戶(hù)自身操作導(dǎo)致細(xì)胞污染、細(xì)胞狀態(tài)不佳、細(xì)胞凍存后復(fù)蘇不活 的，不予免費(fèi)重發(fā)。

5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，使用其他非細(xì)胞培養(yǎng)體系外源試劑處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問(wèn)題，不予免費(fèi)重發(fā)。

6.非細(xì)胞出廠(chǎng)質(zhì)量問(wèn)題，客戶(hù)自身操作導(dǎo)致的細(xì)胞死亡，自收貨日起一個(gè)月內(nèi)可以申請(qǐng)低價(jià)二次購(gòu) 買(mǎi)折扣(原代細(xì)胞除外)。

7.細(xì)胞相關(guān)實(shí)驗(yàn)受多種因素影響，非細(xì)胞鑒定問(wèn)題，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)不理想的，不予退/換細(xì)胞。

常溫細(xì)胞收貨注意事項(xiàng)：

觀(guān)察是否有異常現(xiàn)象

收到貨后如發(fā)現(xiàn)有任何異?，F(xiàn)象，如污染，漏液，細(xì)胞漂浮等，請(qǐng)拍照記錄，并及時(shí)聯(lián)系我們銷(xiāo)售 人員或者技術(shù)支持。

將培養(yǎng)瓶放置培養(yǎng)箱中靜止

用75%酒精擦拭瓶身，封口膜可以不用撕去，將 T25 瓶置于培養(yǎng) 箱中靜置2~4h 后進(jìn)行操作，(注意：懸浮細(xì)胞請(qǐng)將培養(yǎng)瓶豎立在 培養(yǎng)箱中靜置),在此期間，請(qǐng)查看說(shuō)明書(shū)以確定細(xì)胞屬性。

觀(guān)察細(xì)胞密度是否超過(guò)80%

觀(guān)察細(xì)胞密度，若超過(guò)80%則可正常傳代處理(有些原代細(xì)胞不 可傳代，請(qǐng)仔細(xì)查閱細(xì)胞說(shuō)明書(shū)并根據(jù)實(shí)際情況決定),首次傳代推 薦比例1:2。

注意：傳代比例指的是同等大小容器的前提下，如需更換培養(yǎng)容器，則需換算培 養(yǎng)容器貼壁面積，例如：一個(gè)T25 瓶的貼壁面積相當(dāng)于1個(gè)6cm 的皿，1個(gè)10cm的皿的貼壁面積相當(dāng)于3個(gè)T25瓶，1個(gè)T75瓶的貼壁面積相當(dāng)于3個(gè)T25 瓶。

觀(guān)察細(xì)胞密度，若細(xì)胞密度不到80%,建議吸出運(yùn)輸培養(yǎng)基，加入5ml 細(xì)胞完全培養(yǎng)基，培養(yǎng) 到可傳代密度。