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特點(diǎn)	準(zhǔn)備 DF12培養(yǎng)基；DMEM:F12；15% HS20mM HEPES；雙抗，1%。培養(yǎng)條件：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為 70%-80%。
特性	形態(tài)：上皮細(xì)胞樣，貼壁生長(zhǎng)。MA-10 小鼠睪丸上皮樣細(xì)胞是一種來(lái)源于可移植 Leydig 細(xì)胞腫瘤 M5480P 睪丸的細(xì)胞系，通過(guò)在培養(yǎng)物和宿主動(dòng)物中交替生長(zhǎng)。克隆從培養(yǎng)來(lái)源的腫瘤中獲得的細(xì)胞。確定一個(gè)名為 MA-10 的克隆保留了功能性 hCG 受體。這些細(xì)胞響應(yīng)人絨毛膜促性腺激素（hCG）合成孕酮。 www.atcc.org/Products/CRL-3050
優(yōu)勢(shì)	已通過(guò)STR鑒定

一.消毒靜置等細(xì)胞穩(wěn)定后拍照 100X 和 200X。棄去培養(yǎng)上清，用 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次并吸走。

二. T25 瓶加入 0.25％EDTA 胰蛋白酶 1-2ml 于培養(yǎng)瓶中震蕩混勻，如果屬于貼壁不牢固的細(xì)胞很容易脫落的就

培養(yǎng)箱外面消化震蕩待脫落90%以上終止消化，一般小于1分鐘以內(nèi)，甚至不加胰酶有部分貼壁非常不牢固的細(xì)胞也會(huì)

自然震蕩脫落。如果是貼壁牢固的細(xì)胞則置于37℃培養(yǎng)箱中消化提高效率，每40-50秒拿出培養(yǎng)箱震蕩幫助細(xì)胞脫落，

如脫落90%以上則對(duì)應(yīng)3-6ml含有10%血清的完全培養(yǎng)基終止徹底，以防胰酶殘留損傷細(xì)胞。如果貼壁非常牢固的細(xì)胞，

脫落的比例比較低，也不超過(guò)2分鐘后終止消化徹底，再加入1ml完全培養(yǎng)基讓細(xì)胞緩沖后再過(guò)2分鐘進(jìn)行二次消化，反

復(fù)分步消化以降低單次消化時(shí)長(zhǎng)，減少刺激，保護(hù)細(xì)胞膜。或采用刮產(chǎn)刮細(xì)胞的方式處理也可以。總歸原則是達(dá)到消化

目的的同時(shí)減少細(xì)胞膜受到的損傷越小越好。

三.消化完成后輕輕吹勻后吸出，在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液

按1：2的比例分到新T25瓶/6cm培養(yǎng)皿中，添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力，

后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2和以上比例進(jìn)行，具體以實(shí)際細(xì)胞密度決定。期間多的細(xì)胞一定保存多份細(xì)胞凍存管備種。

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