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NCI-H526,人小細胞肺癌

產(chǎn)品貨號ALWS-800
產(chǎn)品規(guī)格T25
目錄價格 2000.00
产品信息
特點 1640+10%FBS
特性
優(yōu)勢
產(chǎn)品詳情

細胞接收處理過程:

1、請顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時 細胞狀態(tài)的依據(jù)。

2、收到細胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi),嚴格無菌操作,不開瓶蓋放培養(yǎng) 箱靜置2-3小時穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3、鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,重新加入6ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2培養(yǎng) 箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存。

4、懸浮細胞需離心收集處理。抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心3-5分鐘,棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中(加入按照 說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基)。

(注意:若發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶,處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng),記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松,初次傳代最好使用T25培養(yǎng)瓶或6cm小皿1傳2)

貼壁細胞漂浮的處理方法:

注意:部分細胞由于貼壁松散,會出現(xiàn)運輸后漂浮,冬天氣溫低時也會出現(xiàn)細胞收縮漂浮,屬于不可避免 因素,正確處理后均可以正常生長。

STEP1:將培養(yǎng)瓶內(nèi)所有培養(yǎng)基轉(zhuǎn)入無菌離心管,離心收集細胞(1200rpm約250g-300g離心力,離心3-5min)去除舊培養(yǎng)基;

STEP2:用PBS重懸細胞,將所有細胞收集到一個離心管中,再次離心(1200rpm約250g-300g離心力,離心3-5min)去除PBS;

STEP3:加入1ml左右胰酶EDTA溶液,0.25%重懸細胞,混勻即可,建議震動離心管混勻,避免吹打細 胞,放入培養(yǎng)箱消化細胞,根據(jù)細胞特性決定消化時間(TM3、TM4、293 系列約1~2分鐘);

注意:部分細胞不能使用胰酶消化,請注意查看細胞說明書;單顆漂浮的細胞不需要胰酶處理。

STEP 4:消化好后,用移液槍輕輕吹打細胞懸液,使細胞團分散,迅速加入3-5ml含10%以上血清的培養(yǎng)基混勻終止消化,離心(1200rpm 3min)去除胰酶;

STEP5:加入5ml左右的細胞完全培養(yǎng)基混勻,按比例接入無菌培養(yǎng)瓶中;

STEP6:顯微鏡下觀察細胞是否成均勻分散的單顆細胞,若有3-5個成團的小細胞團可不用重新消化,使之貼壁后待細胞生長穩(wěn)定后再次傳代消散細胞。

懸浮細胞收集的處理方法:

注意:瓶中運輸培養(yǎng)基不能繼續(xù)使用,請換用按照說明書培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。培養(yǎng) 懸浮細胞建議用未經(jīng)TC處理的培養(yǎng)瓶。

STEP1:靜置4h后,請將瓶內(nèi)所有細胞收集至6個15ml 的離心管110g(1000rpm)  離心3min, 將所有離心 后的細胞沉淀收集到一個T25 培養(yǎng)瓶內(nèi),平放10分鐘,鏡下觀察細胞密度,拍照記錄后放入培養(yǎng)箱中繼 續(xù)培養(yǎng),第二天密度達到80%即可傳代;

STEP2:懸浮細胞半換液處理:將培養(yǎng)瓶豎立在培養(yǎng)箱中靜置1小時左右,輕輕吸掉瓶內(nèi)3ml 培養(yǎng) 基,然后補給3ml 的細胞完全培養(yǎng)基,傳代的時候可以直接補給5ml 細胞完全培養(yǎng)基,分兩個培養(yǎng)瓶 培養(yǎng),一般這樣傳代3次左右可以離心傳代一次,去掉死細胞;

STEP3:懸浮細胞傳代方法:觀察細胞無碎片無死細胞的情況下,建議直接加入新鮮的細胞完全培養(yǎng)基直 接分瓶即可。

售后服務(wù):

1.常溫細胞為 T25 培養(yǎng)瓶發(fā)貨,若收到細胞后狀態(tài)差,活率低,請當天拍照記錄,發(fā)給技術(shù)支持或 者銷售人員;根據(jù)情況,不能調(diào)整或者調(diào)整培養(yǎng)一周后,狀態(tài)沒好轉(zhuǎn)的,可給予重發(fā)細胞。

2. 收到細胞24小時內(nèi)出現(xiàn)細菌、真菌、霉菌污染給于免費重發(fā)。4 8 小 時檢測支原體陽性無條件重發(fā) 。(吸取上清至冰箱保存48小時之后檢測的不算準確結(jié)果)收到細胞有污染現(xiàn)象,請于收貨當天 及時拍照記錄,提供清晰的照片(照片為原培養(yǎng)瓶未拆封外觀照和顯微鏡下細胞狀態(tài)的照片);在培養(yǎng) 瓶未開封的情況下,可給予重發(fā)細胞。

3.若收到細胞有漏液現(xiàn)象,請于收貨當天及時拍照記錄(照片為原培養(yǎng)瓶未拆封外觀照和顯微鏡下細 胞狀態(tài)的照片);請保留原瓶培養(yǎng)基,并將原瓶培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到一個無菌的容器內(nèi)培養(yǎng),培養(yǎng)3天內(nèi)出現(xiàn) 細胞污染現(xiàn)象,可給予重發(fā)細胞。

4. 收到常溫細胞時狀態(tài)無異常,用戶自身操作導致細胞污染、細胞狀態(tài)不佳、細胞凍存后復蘇不活 的,不予免費重發(fā)。

5. 細胞培養(yǎng)時,使用其他非細胞培養(yǎng)體系外源試劑處理導致細胞出現(xiàn)問題,不予免費重發(fā)。

6.非細胞出廠質(zhì)量問題,客戶自身操作導致的細胞死亡,自收貨日起一個月內(nèi)可以申請低價二次購 買折扣(原代細胞除外)。

7.細胞相關(guān)實驗受多種因素影響,非細胞鑒定問題,實驗數(shù)據(jù)不理想的,不予退/換細胞。

常溫細胞收貨注意事項:

觀察是否有異?,F(xiàn)象

收到貨后如發(fā)現(xiàn)有任何異常現(xiàn)象,如污染,漏液,細胞漂浮等,請拍照記錄,并及時聯(lián)系我們銷售 人員或者技術(shù)支持。

將培養(yǎng)瓶放置培養(yǎng)箱中靜止

75%酒精擦拭瓶身,封口膜可以不用撕去,將 T25 瓶置于培養(yǎng) 箱中靜置2~4h 后進行操作,(注意:懸浮細胞請將培養(yǎng)瓶豎立

 

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