細胞接收處理過程：

1、請顯微鏡下確認細胞狀態(tài)，同時給剛收到的細胞拍照（10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存，作為售后時收到時 細胞狀態(tài)的依據(jù)。

2、收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，不開瓶蓋放培養(yǎng) 箱靜置2-3小時穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

3、鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，重新加入6ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2培養(yǎng) 箱培養(yǎng)；超過80%匯合度時，根據(jù)情況傳代或者凍存。

4、懸浮細胞需離心收集處理。抽出瓶中的培養(yǎng)基和細胞1000rpm離心3-5分鐘，棄去上清重懸后接種到新的培養(yǎng)瓶中（加入按照 說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基）。

（注意：若發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶，處理完后放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)，記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，初次傳代最好使用T25培養(yǎng)瓶或6cm小皿1傳2）

貼壁細胞漂浮的處理方法:

注意：部分細胞由于貼壁松散，會出現(xiàn)運輸后漂浮，冬天氣溫低時也會出現(xiàn)細胞收縮漂浮，屬于不可避免 因素，正確處理后均可以正常生長。

STEP1：將培養(yǎng)瓶內所有培養(yǎng)基轉入無菌離心管，離心收集細胞(1200rpm約250g-300g離心力，離心3-5min)去除舊培養(yǎng)基;

STEP2：用PBS重懸細胞，將所有細胞收集到一個離心管中，再次離心(1200rpm約250g-300g離心力，離心3-5min)去除PBS;

STEP3：加入1ml左右胰酶EDTA溶液，0.25%重懸細胞，混勻即可，建議震動離心管混勻，避免吹打細 胞，放入培養(yǎng)箱消化細胞，根據(jù)細胞特性決定消化時間(TM3、TM4、293 系列約1~2分鐘);

注意：部分細胞不能使用胰酶消化，請注意查看細胞說明書;單顆漂浮的細胞不需要胰酶處理。

STEP 4：消化好后，用移液槍輕輕吹打細胞懸液，使細胞團分散，迅速加入3-5ml含10%以上血清的培養(yǎng)基混勻終止消化，離心(1200rpm 3min)去除胰酶;

STEP5:加入5ml左右的細胞完全培養(yǎng)基混勻，按比例接入無菌培養(yǎng)瓶中;

STEP6:顯微鏡下觀察細胞是否成均勻分散的單顆細胞，若有3-5個成團的小細胞團可不用重新消化，使之貼壁后待細胞生長穩(wěn)定后再次傳代消散細胞。

懸浮細胞收集的處理方法:

注意：瓶中運輸培養(yǎng)基不能繼續(xù)使用，請換用按照說明書培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。培養(yǎng) 懸浮細胞建議用未經TC處理的培養(yǎng)瓶。

STEP1:靜置4h后，請將瓶內所有細胞收集至6個15ml 的離心管110g(1000rpm)  離心3min, 將所有離心 后的細胞沉淀收集到一個T25 培養(yǎng)瓶內，平放10分鐘，鏡下觀察細胞密度，拍照記錄后放入培養(yǎng)箱中繼 續(xù)培養(yǎng)，第二天密度達到80%即可傳代；

STEP2:懸浮細胞半換液處理：將培養(yǎng)瓶豎立在培養(yǎng)箱中靜置1小時左右，輕輕吸掉瓶內3ml 培養(yǎng) 基，然后補給3ml 的細胞完全培養(yǎng)基，傳代的時候可以直接補給5ml 細胞完全培養(yǎng)基，分兩個培養(yǎng)瓶 培養(yǎng)，一般這樣傳代3次左右可以離心傳代一次，去掉死細胞；

STEP3:懸浮細胞傳代方法：觀察細胞無碎片無死細胞的情況下，建議直接加入新鮮的細胞完全培養(yǎng)基直 接分瓶即可。

售后服務：

1.常溫細胞為 T25 培養(yǎng)瓶發(fā)貨，若收到細胞后狀態(tài)差，活率低，請當天拍照記錄，發(fā)給技術支持或 者銷售人員；根據(jù)情況，不能調整或者調整培養(yǎng)一周后，狀態(tài)沒好轉的，可給予重發(fā)細胞。

2. 收到細胞24小時內出現(xiàn)細菌、真菌、霉菌污染給于免費重發(fā)。4 8 小 時檢測支原體陽性無條件重發(fā) 。(吸取上清至冰箱保存48小時之后檢測的不算準確結果)收到細胞有污染現(xiàn)象，請于收貨當天 及時拍照記錄，提供清晰的照片(照片為原培養(yǎng)瓶未拆封外觀照和顯微鏡下細胞狀態(tài)的照片);在培養(yǎng) 瓶未開封的情況下，可給予重發(fā)細胞。

3.若收到細胞有漏液現(xiàn)象，請于收貨當天及時拍照記錄(照片為原培養(yǎng)瓶未拆封外觀照和顯微鏡下細 胞狀態(tài)的照片);請保留原瓶培養(yǎng)基，并將原瓶培養(yǎng)基轉移到一個無菌的容器內培養(yǎng)，培養(yǎng)3天內出現(xiàn) 細胞污染現(xiàn)象，可給予重發(fā)細胞。

4. 收到常溫細胞時狀態(tài)無異常，用戶自身操作導致細胞污染、細胞狀態(tài)不佳、細胞凍存后復蘇不活 的，不予免費重發(fā)。

5. 細胞培養(yǎng)時，使用其他非細胞培養(yǎng)體系外源試劑處理導致細胞出現(xiàn)問題，不予免費重發(fā)。

6.非細胞出廠質量問題，客戶自身操作導致的細胞死亡，自收貨日起一個月內可以申請低價二次購 買折扣(原代細胞除外)。

7.細胞相關實驗受多種因素影響，非細胞鑒定問題，實驗數(shù)據(jù)不理想的，不予退/換細胞。

常溫細胞收貨注意事項：

觀察是否有異常現(xiàn)象

收到貨后如發(fā)現(xiàn)有任何異?，F(xiàn)象，如污染，漏液，細胞漂浮等，請拍照記錄，并及時聯(lián)系我們銷售 人員或者技術支持。

將培養(yǎng)瓶放置培養(yǎng)箱中靜止

用75%酒精擦拭瓶身，封口膜可以不用撕去，將 T25 瓶置于培養(yǎng) 箱中靜置2~4h 后進行操作，(注意：懸浮細胞請將培養(yǎng)瓶豎立在 培養(yǎng)箱中靜置),在此期間，請查看說明書以確定細胞屬性。

觀察細胞密度是否超過80%

觀察細胞密度，若超過80%則可正常傳代處理(有些原代細胞不 可傳代，請仔細查閱細胞說明書并根據(jù)實際情況決定),首次傳代推 薦比例1:2。

注意：傳代比例指的是同等大小容器的前提下，如需更換培養(yǎng)容器，則需換算培 養(yǎng)容器貼壁面積，例如：一個T25 瓶的貼壁面積相當于1個6cm 的皿，1個10cm  的皿的貼壁面積相當于3個T25瓶，1個T75瓶的貼壁面積相當于3個T25 瓶。

觀察細胞密度，若細胞密度不到80%,建議吸出運輸培養(yǎng)基，加入5ml 細胞完全培養(yǎng)基，培養(yǎng)到可傳代密度。

特殊細胞收到注意事項

部分細胞由于貼壁不牢在運輸過程中發(fā)生細胞脫落，這是正?，F(xiàn)象，正確處理后都可以正常生長。

1、將培養(yǎng)瓶內所有培養(yǎng)基轉入無菌離心管，離心收集細胞（1200rpm3-5min）去除舊培養(yǎng)基；

2、用PBS重懸細胞，將所有細胞收集到一個離心管中，再次離心（1200rpm3-5min）去除PBS；

3、加入1ml左右0.25%胰酶重懸細胞，混勻即可，不能吹打太多次，放入培養(yǎng)箱消化，根據(jù)細胞特性決定消化時間（約1~2分鐘）；

4、消化好后，用移液槍輕輕吹打細胞懸液，使細胞團分散，迅速加入3-5ml完全培養(yǎng)基混勻以終止消化，離心（1200rpm3-5min） 去除胰酶；

5、加入5ml左右細胞相應的完全培養(yǎng)基混勻，按比例接入無菌培養(yǎng)瓶/皿中；

6、顯微鏡下觀察看細胞是否成均勻分散的單顆細胞，若有3-5個成團的小細胞團可不用重新消化，使之貼壁，待細胞生長穩(wěn)定后再 消散細胞。